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双萤光素酶检测结果系统详细介绍

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选用的介绍
miRNA首要凭借影响于靶染色体组的3’UTR起影响(生物降解或抑制性翻譯),将意义染色体组3’UTR(天然的型和综合位点突变性型)队列创建至形式中通知单染色体组F-Luc的3’端,凭借相当过传达miRNA后,通知单染色体组传达的提升(萤光素酶的活性氧下调也是始终不变),来知道miRNA与靶染色体组3’UTR的影响位点。

转录系数大部分凭借做用于靶什么是染色体的起动子起做用,将最终目的什么是染色体起动子区编码序列更换通知单什么是染色体F-Luc的起动子,凭借共展现出转录系数后,通知单什么是染色体展现出的影响,来知道转录系数与靶什么是染色体起动子组合位点及对靶什么是染色体的做用。

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水平路径
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通常利用走向分析
● 查证miRNA同mRNA靶向治疗互作。将靶mRNA的3’UTR字段插入图评估基因组媒体,再共转为该miRNA,如果你萤光素酶活性酶增涨,则警告为其靶字段。
● 验证miRNA同circRNA靶向互作。将circRNA序列插入报告基因载体中F-Luc的3’UTR区域,检测萤光素酶活性。
● 验证miRNA同lncRNA靶向互作。将lncRNA序列插入报告基因载体中F-Luc的3’UTR区域,检测萤光素酶活性。
● 启动子活性分析。将启动子区域序列进行分段截短,再分别构建入报告基因载体,检测其启动子活性。
● 验证特定转录因子同启动子的作用。将启动子区域插入报告基因载体,同时在实验细胞中共转该转录因子,分析转录因子过表达是否提高萤光素酶活性。
● 分析信号通路是否激活。将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体,在不同上游信号条件下,萤光素酶活性代表了通路的下游响应。
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