【J Immunother Cancer】苏长青/钦伦秀创业团队呈现嵌合溶瘤腺细菌功克线下癌症的融合策略

 

溶瘤病毒（OV）介导的基因治疗是一种重要的新兴癌症治疗策略_[1]，研究表明，OVs感染的癌细胞会分泌大量细胞因子，而被裂解的肿瘤细胞会释放多种肿瘤相关抗原。溶瘤病毒治疗不仅可以触发免疫应答，而且可以改变肿瘤微环境，促进化疗和放疗的效果，提高免疫检查点抑制剂治疗和免疫细胞治疗的疗效_[2]。

溶瘤腺病毒（OAVs）作为携带抗癌基因的载体，可以在癌细胞内严格启动病毒复制，进而实现高拷贝扩增和高效表达抗癌基因，从而实现病毒复制溶瘤和基因表达抑瘤的双重抑癌作用而不影响正常细胞。然而，OAV的靶向肿瘤特异性和抗癌作用在实践中尚未达到预期，单独使用OVs治疗的临床结果仍不能令人满意。

 

近期，海军军医大学苏长青团队与复旦大学华山医院钦伦秀团队合作在Journal for ImmunoTherapy of Cancer杂志上发表题为Triple-serotype chimeric oncolytic adenovirus exerts multiple synergistic mechanisms against solid tumors的研究论文，苏英晗博士和黎江博士为该文共同一作。研究团队设计具有多种协同抗癌活性的嵌合OAV（OncoViron），文章详细阐述了三血清型嵌合溶瘤腺病毒对实体肿瘤发挥多种协同机制_[3]。

OncoViron是一款多重机制协同和增效免疫治疗的嵌合型广谱溶瘤腺病毒，具有三重肿瘤靶向调控机制、三个病毒结构基因改造、三种血清型腺病毒嵌合、三类抗癌免疫基因装载的特点。OncoViron优势:(1)针对癌细胞的病毒复制在转录水平和翻译水平上都有精确的调控;(2)多个病毒结构蛋白的固有抗癌活性被激活;(3)感染癌细胞的能力增强，保证病毒本身不被已有的中和抗体拦截及肝细胞吸附;(4)武装三种抗癌免疫调节基因，增强杀死癌细胞的效果。
 

 

结果

01  OncoViron具有较高的肿瘤选择性复制活性

  探讨人群制定的OncoViron选购肺部癌症特异形初始化子对肺部癌症组织人体受损生殖内部选购性粘贴，ODD元器件作基因组启闭在英译技术水平已达制一切普通 组织人体受损生殖内部中的病菌粘贴。Ad5/Ad11纤毛嵌合病菌Ad5SVPF11及很多攜帶单、双或分为三类组织人体受损生殖内部因素的病菌均能在各式各样线下实体模型肺部癌症组织人体受损生殖内部中高副本粘贴。身体组织人体受损生殖内部實驗結果显示，OncoViron在属于肝癌、乳房增生癌、胆囊癌、肺癌患者等绝对多数线下实体模型瘤组织人体受损生殖内部系中呈高副本繁殖，而在一切普通 组织人体受损生殖内部系中繁殖催化活性较低 (图1)。  

图1 OncoViron肿瘤细胞特异性的增殖复制

02  纤毛Ad5F11与六邻体Ad5H48的嵌合增强OncoViron的感染性

  柯萨奇艾滋电脑病毒码码码码腺艾滋电脑病毒码码码码肾上腺素肾上腺素蛋白激酶(CAR)是Ad5的肾上腺素肾上腺素蛋白激酶，对欠缺CAR的骨髓造血内部、造血干内部、树突状内部、部位癌肿内部更是是癌肿干内部等艾滋电脑病毒码码率很低。B组腺艾滋电脑病毒码码码码则主要识别系统系统其中一种广泛的表达方式的补体调控球蛋清酶质CD46。用于B组腺艾滋电脑病毒码码码码的纤毛球蛋清酶质(fiber knob)充当Ad5纤毛球蛋清酶质，Ad5纤毛与Ad11纤毛嵌合行成嵌合纤毛球蛋清酶质Ad5F11来倡导嵌合艾滋电脑病毒码码码码，使之加大识别系统系统CD46肾上腺素肾上腺素蛋白激酶的转化率，有好处于不断提高艾滋电脑病毒码码码码对癌肿内部艾滋电脑病毒码码率。   流式的細胞术(FCM)看见，在太越多越癌細胞株中，CD46的表达出总体水平远超CAR(图2A)，而Ad5F11嵌合病毒影响Ad5SVPF11H48-DsRed在太越多越癌細胞株中的影响性清晰优于Ad5纤愿因毒影响Ad5SVPH48-EGFP。Ad5F11嵌合显著性增进了OAV在太越多越癌細胞中的影响实力。   Ad5在自动界会存在吴方言，绝大部分数人已被患上并会产生了结合免疫力抗体阳性，也可以拦住相当血清型的hiv病毒码样本，探索人员管理将腺hiv病毒码样本表壳蛋清Hexon的高变区(HVR)与稀带血清型如Ad48腺hiv病毒码样本的Hexon根据地域开展嵌合，小动物实验室发现Ad5H48嵌合使OncoViron能放弃原有的免疫力结合免疫力抗体阳性的拦住，肝癌细胞对OncoViron的黏附性和患上也有效增多（图2）。  

图2 纤毛Ad5F11与六邻体Ad5H48嵌合增强OncoViron的感染性

 

03  OncoViron介导抗癌细胞因子的高表达且影响肿瘤细胞的转录表达谱

  深入分析员工以MOI＝5pfu/cell的妇科感然抗弯强度添加OncoViron做出人体细胞妇科感然，立即培养教育24h、48h、72h后，征集上清，依据ELISA的方式论文检测IL‑12、IFN‑γ、CCL5DNA血清把你想表达出方式出来环境。后果出现，OncoViron可介导IFN‑γ、IL‑12、CCL5血清高效益把你想表达出方式出来，另外马上间提高把你想表达出方式出来量渐渐的增长。   进几步的研究OncoViron对神经内部转录体现谱的不良影响，找到不同体现dna(DEGs)大部分含有于神经内部整个过程的局灶黏附和主宰体的职能，与PI3K-Akt、神经内部因素-神经内部因素肾上腺素受体互相能力和MAPK信号通路（图3）。  

图3 OncoViron介导抗癌细胞因子的高表达且影响细胞转录谱

 

04  OncoViron诱导肿瘤选择性杀伤活性

  城市热力图神经元了解意味着OncoViron对各式各样小平面癌症神经元系均有重要的神经元毒能力，且呈含水量定律和准确时间定律问题。在一般数癌神经元系中，三个血清型腺木马嵌合的OncoViron比二者血清型腺木马嵌合的Ad5SVPF11-C3突出表现出更强的溶瘤活性酶类（图4）。  

05  OncoViron在肿瘤动物模型中发挥抗癌作用

  OncoViron对多类三维线肺部良性淋巴肿瘤具有着优良的抗良性淋巴肿瘤几丁质酶酶，经由对小鼠移植后瘤沙盘模型瘤内滴注实验设计反映出，OncoViron手术治疗仅仅肺部良性淋巴肿瘤上皮内部繁衍几丁质酶酶骤降，并且侵润抗体性上皮内部用户新增，反映出肺部良性淋巴肿瘤抗体性微学习环境发生的了凸显调整（图5）。  

图5 OncoViron在肿瘤模型中发挥抗癌作用

06  OncoViron联合免疫治疗可协同抑制肿瘤生长

  科学研究人员管理用C57-hPD1人源化小鼠育苗直肠癌生殖細胞MC38，在校园营销推广活动的环节之中所构建试管移植瘤建模测试PD-1表面抗原，单药和共同药物进行治疗动物界科学试验否认OncoViron与PD-1促使剂Keytruda共同药物进行治疗享有融合提效的效果。天然天然免疫组化显示信息，在OncoViron分布不均和形容mE1a的同样区域性，良性肿瘤组织安排大建筑面积损伤，伴随腮腺生殖細胞、单线程巨噬生殖細胞、树突状生殖細胞(DCs)、成玻纤生殖細胞涌入，演变成TME中的其次腮腺样成分，对癌生殖細胞充当原位融合攻击效果，最后不断增强天然天然免疫进行治疗的成效（图6）。  

图6 OncoViron联合PD-1抗体对移植瘤模型具有协同抗癌作用

  小说作品进步骤倡导CAR‑T神经元，直接倡导差异肺部肿瘤绿色类别实现单药和综合使用冶疗，报告单表达OncoViron真是要利于CAR-T神经元的增值能力和侵润性，达成其中一种信息化体系，正相关增加冶疗疗效（图7）。  

图7 OncoViron联合CAR–T对移植瘤模型具有协同抗癌作用

 

结论

 本文研究发现OncoViron的选择性复制介导抗癌因子的高表达，特异性靶向多种实体肿瘤，显著抑制癌细胞增殖。在免疫缺陷小鼠、免疫增强小鼠和人源化小鼠的多种植入实体肿瘤模型上，OncoViron自身以及与程序性死亡1 (PD-1)抗体和嵌合抗原受体(CAR)T细胞联合显示了巨大的抗癌作用。OncoViron显著改变了受感染癌细胞的基因表达谱，不仅招募大量淋巴细胞、自然杀伤细胞和单核巨噬细胞进入肿瘤微环境(TME)，并激活免疫细胞，特别是T细胞，且诱导巨噬细胞M1极化并促进更多免疫细胞因子的释放，从而重塑TME以配合PD-1抗体或CAR-T治疗。嵌合OncoViron是一种新型广谱抗癌产品，具有多种协同和增强免疫治疗机制，为联合免疫治疗实体肿瘤创造了良好的机会。   


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参考文献：

[1] Heidbuechel JPW, Engeland CE. Oncolytic viruses encoding bispecific T cell engagers:a blueprint for emerging immunovirotherapies.J Hematol Oncol 2021;14:63.

[2] Nishio N, Dotti G. Oncolytic virus expressing RANTES and IL-15 enhances function of CAR-modified T cells in solid tumors. Oncoimmunology 2015;4:e988098.

[3] Yinghan Su, Jiang Li.,et al. Triple-serotype chimeric oncolytic adenovirus exerts multiple synergistic mechanisms against solid tumors.J Immunother Cancer.2022 May;10(5):e004691.doi: 10.1136/jitc-2022-004691.