肺脏(Lung)是哺乳动物呼吸系统中最重要的器官,其主要功能是将氧气送入血液,并将二氧化碳排出体外,除呼吸调节功能外、肺脏还承载着防疫、免疫、肺循环、造血等多种重要的功能。肺脏包括支气管、小(细)支气管、肺泡管和肺泡,肺泡是支气管树的终末部分,是肺部气体交换的主要部分,也是肺的功能单位。


重组腺相关病毒载体(recombinant Adeno-associated virus, rAAV)具有血清型种类多样、免疫原性低、长期稳定表达基因、宿主范围广等优势,在基因功能研究和基因治疗递送载体中占据主导地位。基于转基因动物的局限性,借助rAAV载体高效感染肺脏用于肺部疾病的建模和治疗策略已成为越来越多研究者的选择。
01 AAV血清型的选择
目前AAV1、AAV2、AAV5、AAV6、AAV6.2ff、AAV9等血清型均被报道可以转导动物肺脏,基于血清型嗜性、注射方式及研究对象的不同,这些AAV对于肺脏的转导效率及感染部位也表现出差异。如AAV9经气管注射主要感染肺泡上皮细胞,对于支气管上皮细胞的感染极少;AAV6和AAV6.2ff经气管注射可以高效转导支气管和肺泡上皮细胞,且在肺类器官中也表现出良好的感染效率,这几种AAV也是目前用于肺部基因递送用的较多的血清型。
肺实质是治疗肺部遗传性疾病如表面活性物质缺乏和间质性肺疾病的关键目标,特别是肺泡II型上皮细胞(alveolar type II,ATⅡ),其表达对表面活性剂功能至关重要的蛋白质,参与免疫反应以及转分化等多种功能,是肺部疾病基因治疗的靶细胞群体。最近,。




02 启动子选择
除了上述提到的基于AAV血清型嗜性外,亦可以借助细胞特异性启动子完成特异性靶向操作。如对于肺泡II型上皮细胞的特异性感染可以借助SP-C(surfactant protein C)特异启动子实现,此外,hFLT1或Tie1可以实现内皮细胞的感染,SM22a用于血管平滑肌的特异性感染。
03 注射方式的选择及病毒注射量
对于肺部的病毒感染,一般递送途径包括两类:系统注射(经血液循环)、鼻内或气管内递送(经呼吸道)。系统注射会同时感染其他脏器,病毒被稀释,使得靶向肺脏的病毒减少,因此需要考虑血清型的选择,如AAV-LungX,经静脉注射可以实现特异靶向肺脏内皮细胞的高效转导;呼吸道递送可以实现大程度的特异性递送,并实现肺部的高效表达,同时降低病毒剂量,但会有操作难度限制,且可能导致感染不均匀,有手术风险等缺陷。
各不相同注谢办法会比较


04 应用案例
萎缩性闭塞性肺妇科熟悉疾病(Chronic obstructive pulmonary disease ,COPD)就是种萎缩性支原体感染性妇科熟悉疾病,不谏为世界各国第五大熟悉病因。2030年华南科技开发学校同济临床医教育谢俊刚传授专业团体在Oxidative Medicine and Cellular Longevity半月刊先生发表的运行中,借着rAAV承载介导MTMR14在COPD小鼠肺里过描述,相结一部验正发展MTMR14过描述能否压制小鼠COPD的进行。

| 病毒码品牌 | AAV-MTMR14 |
| 實驗家禽 | 小鼠 |
| 注入习惯 | 气管道滴注 |
| 沾染关键部位 | 肺脏 |
| 病毒码用水量 | 2E+11VG, 50μL |
| 查测的时间 | 31天 |
2019冠状病毒病(COVID-19)是一种由严重急性呼吸道综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)引发的传染病,是一场全球性公共卫生危机。SARS-CoV-2的核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N蛋白)在病毒生命周期的多个步骤中发挥关键作用。2021年8月,Nature Communications杂志刊登了暨南大学吴建国教授团队的工作,该研究揭示了SARS-CoV-2 N蛋白通过NLRP3炎症小体诱导肺损伤的新机制。文中,研究团队借助AAVlung经尾静脉注射在小鼠肺部高表达N蛋白(AAVlung-N)发现过表达N蛋白后,可显著增加IL-1β,IL-6,TNF,CXLC10,CCL2等炎症因子的表达,且肺部有明显的炎症病变及组织损伤。

2023年5月,暨南大学吴建国教授团队成员再添力作,由潘攀/李永奎/陈欣联合在Signal Transduction and Targeted Therapy杂志发表研究论文。文中,研究团队再次运用AAVlung血清型在小鼠肺部高表达N蛋白,揭示了新冠病毒通过N蛋白抑制细胞凋亡促进病毒复制的分子机制,为新冠病毒的高效传播和感染致病机理提供了新的认识。

| 病毒是什么软件 | AAV-Lung-N-EGFP |
| 调查节肢动物 | 小鼠 |
| 肌注方式 | 尾静脉血管肌内注射 |
| 病毒脏器 | 肺脏 |
| 病毒样本的使用量 | 5E+11VG |

| 蠕虫病毒类产品 | rAAV2/9-Tgfb1 shRNA |
| 研究家禽 | 小鼠 |
| 肌内注射方式方法 | 气管打瘦脸针 |
| 患上部件 | 肺脏 |
| 病原体摄入量 | 1E+11VG,50μL |
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